1、参观者请保持安静肃穆，不得嬉闹喧哗；爱护历史文物，不得亵渎、损毁国家公祭设施；衣着端庄得体，不得身着、佩戴与设施环境、氛围不符的服饰、图标；服从组织引导，不得扰乱公共秩序。
2、为保持庄严肃穆、环境整洁，馆区禁止擅自摆摊设点，进行销售、游艺、表演、乞讨以及实施其他有损场馆环境与氛围、违反公序良俗的行为。
3、禁止携带易燃、易爆、有毒和有放射性、腐蚀性以及其他可能危及人身、财产安全的危险物品进入馆区。
4、在馆区进行展览、演出、影视剧拍摄、网络直播、采访等活动的，应当征得纪念馆同意。
5、禁止任何单位和个人歪曲、否认南京大屠杀史实，侮辱、诽谤南京大屠杀死难者、幸存者，编造、传播含有上述内容的有损国家和民族尊严、伤害人民感情的言论或者信息，侵害南京大屠杀死难者、幸存者的姓名、肖像、名誉等合法权益。
6、馆区禁止使用具有日本军国主义象征意义的军服、旗帜、图标或者相关道具，拍照、录制视频或者通过网络对上述行为公开传播。
7、凡违反上述规定者，本馆有权予以劝阻和制止。情节严重者报送公安机关依法处理。