与核酸纯化相比，蛋白纯化可是一项相当艰苦的工作。纯化时间长，操作步骤繁琐。有时，在实验室呆了一整天，换来的却是让人伤心的结果，蛋白得率低，纯度差。这时你也许会想，如果纯化蛋白像提质粒一样简单就好了。
如今，你的梦想成真了。clontech（takara旗下）推出了新一代的蛋白纯化试剂盒 – his-tagged purification miniprep kit。真的就像质粒纯化一样，加样、结合、清洗、溶出，几次离心，5分钟即可纯化出100 μg his-tag融合蛋白。
这个系统在纯化柱中安装了尼龙膜，能够在室温下快速操作，无需等待，并且与哺乳动物和细菌的细胞兼容。细胞裂解液中通常有各种添加剂存在，比如β-巯基乙醇、edta、dtt、甘油等，没关系，这个系统也能稳定发挥高性能。
纯化柱中的尼龙膜经过改良，膜的表面积大，能产生高纯度、浓缩的蛋白质。通过这种技术，尼龙膜的蛋白结合能力可媲美树脂，甚至更强。与树脂相比，膜的滴下速度快，可在短时间内进行纯化。柱床体积小，可进行少量、高浓度的溶出。
从2-5 ml培养液中制备出200-800 μl细胞裂解液，加入纯化柱后经过平衡、结合、洗涤和溶出，5分钟即可完成纯化，zui多获得100 μg his-tag融合蛋白。浓度大约在0.3-1 mg/ml。操作流程简便，时间短，可降低蛋白质降解或活性损失的风险，让下游应用的成功率更高。
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